pen icon Colloque
quote

Expression de gènes mutants de la xylanase A de Streptomyces lividans

Martin Roberge
Rolf Morosoli
François Sha-Reck
Dieter Kluepfel
MR

Membre a labase

Martin Roberge

Résumé du colloque

Le xylane est un hétéropolymère composé d'une chaîne principale de xyloses, liées entre eux par des liens β-1,4 et pouvant être substituée par des groupements arabinosyles ou autres sucres, tout dépendant de son origine végétale. L'hydrolyse enzymatique du xylane dans la pâte de papier permet de libérer la lignine et de faire le blanchiment du papier en diminuant l'utilisation de chlore, principal polluant du procédé. Nous avons cloné et caractérisé des gènes de xylanase produits par des mutants de la xylanase A où un seul acide aminé a été modifié en utilisant un système de mutagenèse in vitro dirigée par un oligonucléotide de 15 bases, complémentaire d'une séquence de la xylanase A. Le gène mutant du phagmide pAF217 du plasmide pAF18 en passant par pAM19.1, a permis de produire l'enzyme mutante dans le surnageant de culture d'une souche de S. lividans n'exprimant pas les enzymes chromosomiques d'hydrolyse xylanasique. L'analyse préliminaire des mutants a montré des différences significatives au niveau de l'activité spécifique sur du xylane de bouleau (Sigma). Ensuite, les enzymes mutantes ont été purifiées sur HPLC en deux étapes: Prémirement sur une colonne échangeuse d'ions suivi d'un passage sur tamis moléculaire. La caractérisation des mutants au niveau de la cinétique enzymatique avec différents substrats sera discutée en détails.

Contexte

Section :
Biochimie, biologie moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biochimie, biologie moléculaire
host icon Hôte : Université du Québec à Montréal

Découvrez d'autres communications scientifiques

news icon

Titre du colloque :

Biochimie, biologie moléculaire
Recombinaison spécifique de site chez Chlamydia trachomatis: surproduction et purification du produ…
Jean-Pierre Buisson
Production d'activateur du plasminogène (tPA) et de son inhibiteur (PAI-1) par les lignées cellulai…
France Croze
Étude des propriétés de l'endoprotéase NS du virus de la nécrose pancréatique infectieuse (VNPI)
Serge Corbeil
Voir tous les contenus de ce colloque

Autres communications du même congressiste :

news icon

Thème du colloque :

Biochimie, biologie moléculaire
Expression de gènes mutants de la xylanase A de Streptomyces lividans
Martin Roberge
Expression de gènes mutants de la xylanase A de Streptomyces lividans
Martin Roberge
Expression de gènes mutants de la xylanase A de Streptomyces lividans
Martin Roberge