Colloque

Expression du gène GUS dans des protoplastes d'asperge électroporés

Sandip Mukhopadhyay

Yves Desjardins

Membre a labase

Sandip Mukhopadhyay

Résumé du colloque

Les protoplastes dérivés de cales de deux génotypes d'asperge (Asparagus officinalis L.) ont été électroporés pour introduire le gène β-glucuronidase (GUS). Le niveau d'expression transitoire du gène et la viabilité des protoplastes ont été influencés par le voltage et la durée de l'impulsion électrique. Le niveau d'expression a été augmenté par la présence de polyéthylène glycol (PEG) dans le milieu d'électroporation et aussi par l'augmentation de la concentration d'ADN du plasmide. Comparativement à un traitement avec du PEG seulement, une augmentation considérable de l'activité GUS a été observée avec des traitements de PEG et un choc de chaleur. Un niveau optimal d'activité GUS a été obtenu après électroporation avec une décharge de 500 V/cm d'une durée de 94 ms chez les deux génotypes. Les deux génotypes ont montré des niveaux transitoires d'expression variable. La présente technique est adéquate pour l'obtention de plants transgéniques puisque l'essai histochimique a révélé l'activité GUS aussi bien chez les microcolonies de protoplastes que chez les cales.

Contexte

Section :

Biotechnologie

Thème du colloque :

Biotechnologie

Hôte : Université du Québec à Montréal

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Titre du colloque :

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