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Expression et action des CKI dans les cellules mammaires cancéreuses humaines

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Jacques Lapointe

Résumé du colloque

Les CKI ('cyclin kinase inhibitors') sont des protéines qui inhibent la progression du cycle cellulaire de la phase G1 à S en inhibant l'action des protéines kinases (Cdks) qui sont nécessaires pour cette transition. L'on dénombre aujourd'hui 7 CKIs que l'on identifie à leur poids moléculaire apparent (en kDa), soit p14/p15, p16, p18, p19, p21, p27 et p57 (kDa). Puisque ces protéines jouent un rôle clé dans le contrôle de la prolifération cellulaire, et puisque les gènes p14 et p16 sont délétés dans certaines lignées mammaires humaines cancéreuses, nous avons examiné l'expression de ces gènes dans les cellules MCF-7, ZR-75-1, T-47D, MDA-MB-231, MDA-MB-468 et BT-20. Nous avons mesuré l'expression des CKIs en effectuant une analyse de Southern sur les CKIs amplifiées par RT-PCR à partir d'ARN extrait des différentes lignées. Le profil d'expression des gènes p14 et p16 dans ces cellules correspond à la présence ou l'absence de délétion de ces gènes, sauf dans le cas des cellules T-47D. En effet, nous avons observé que l'absence d'expression du gène p16 dans ces cellules résulte d'une hyperméthylation de ce gène puisque l'on peut induire l'expression de p16 en traitant les T-47D avec le 5-déazadésoxycytidine. Les gènes p18, p21 et p27 sont exprimés dans toutes les lignées examinées. Nous avons de plus analysé les ADNc de ces différentes protéines par SSCP afin d'identifier des mutations ponctuelles dans les parties codantes de ces gènes. Nous avons détecté des polymorphismes aux codons 31 et 109 dans les gènes p21 et p27, respectivement, alors que nous avons découvert une mutation ponctuelle dans le gène p18 des cellules BT-20. Nous sommes présentement en train de caractériser cette nouvelle mutation. Les différentes CKIs ont été transfectées dans les cellules MCF-7 par le biais de vecteurs d'expression dans le but de comparer l'effet des différentes CKIs et de leurs variantes mutées ou polymorphiques. Les résultats de ces analyses nous permettront de mieux comprendre le rôle des différentes CKIs dans le cancer du sein, en particulier en ce qui a trait aux effets des hormones dans le contrôle de la prolifération de ces cellules.

Contexte

news icon Thème du colloque :
Biologie cellulaire et cancer
host icon Hôte : Université McGill

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Titre du colloque :

Biologie cellulaire et cancer

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