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Résumé du colloque
Les milieux réactionnels utilisés pour le dosage de la HMG-CoA réductase, enzyme clé dans la synthèse du cholestérol, contiennent généralement des concentrations élevées de NaCl. Lors de la mise au point du dosage de cette enzyme, plusieurs méthodes ont été suggérées pour séparer l'acide mévalonique (MVA) formé, du HMG-CoA présent dans le milieu. L'extraction quantitative du MVA est rendue extrêmement difficile par la présence de concentrations élevées de sel et requiert l'emploi de standards internes pour calculer le pourcentage d'extraction. Nous avons étudié l'influence du sel sur l'extraction fluide du HMG et de la MVL par des solvants non polaires tels que le toluène et l'éther. Nous avons absorbé le milieu réactionnel sur des bandes de papier filtre pour augmenter la surface d'extraction. Ceci permet aussi de faire l'extraction en phase solide-liquide plutôt qu'en phase liquide-liquide qui est beaucoup moins efficace. Avec les résultats obtenus, nous avons mis au point une méthode simple rapide et reproductible pour la séparation du MVA et du HMG.
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