Colloque

Extraction des acides désoxyribonucléiques du sang total humain de sujets normaux

L.G. Charbonneau

E. Lalague

M. Champagne

G.H. Cousineau

Membre a labase

L.G. Charbonneau

Résumé du colloque

Le sang humain (prélevé dans des tubes héparinés) a été incubé 30 minutes en présence de Protéinase K (200 µg/ml) à 0°C. À ce mélange, ont été ajoutés successivement 2 volumes de tampon HTMW + NP-40, pH 8.3 (Tris, 10 mM; NaCl, 0.1 M; MgCl2, 5 mM; NP-40, 0.1 %) et SDS (Sodium dodecyl sulfate) à une concentration finale de 0.1%. Après une agitation de cinq minutes à la température de la pièce (23°C), ce mélange a été traité au phénol, la phase aqueuse recueillie et retraitée une deuxième fois. La dernière phase aqueuse obtenue a été dialysée 24 hrs contre le tampon D, pH 7.6 (NaCl, 10 mM; MgCl2, 1 mM; CH3COOK, 10 mM). Les acides nucléiques ont été traités à la DNAse et une électrophorèse sur gel de polyacrylamide a démontré l'existence de pics à 28S, 18S, et 4S. Des travaux préliminaires sont effectués présentement sur le sang total de sujets atteints de la maladie de Friedreich (Ataxie de Friedreich).

Contexte

Section :

Biologie cellulaire et moléculaire

Thème du colloque :

Biologie cellulaire et moléculaire

Hôte : Université du Québec à Trois-Rivières

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