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Extraction et analyse des profils électrophorétiques des protéines membranaires des souches multirésistantes de Pseudomonas aeruginosa

Cristina Ciuriai
Richard Morisset
Madeleine Ravaoarinoro
Emil Toma
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Cristina Ciuriai

Résumé du colloque

Une diminution de la perméabilité membranaire chez Pseudomonas aeruginosa (P.a.) se traduit par sa résistance aux antibiotiques. La présente étude compare deux méthodes d'extraction des protéines de la membrane externe (PME): A) solubilisation sélective par le Sarkosyl, B) extraction préparative par ultracentrifugation sur gradient de densité de saccharose. Douze souches de P.a. isolées de sang (2), urine (3), expectoration (3), pus (4) et une souche de référence PAO1 ont été analysées. Les polypeptides ont été séparés par électrophorèse sur gel polyacrylamide (SDS-PAGE) et mis en évidence par coloration au bleu de Coomassie. La méthode A s'avère plus rapide et montre une résolution plus nette des bandes. Le profil électrophorétique PME des PME de PAO1 comporte 6 bandes de PM respectifs: 45 000, 37 000, 35 000, 20 000, 17 000, 8 000. L'analyse des PME des 12 souches de P.a. par la méthode A et 9 multirésistantes: MR- productrices de β-lactamase inductible (P.a1) et l'imipénème (IMP, MR non productrice de β-lactamase (P.a1 IMP et 2 souches sensibles) mène aux observations suivantes: 6 souches MR et 2 souches sensibles présentent le même PME que de PAO1, 3 souches MR présentent le même PME que PAO1 sauf que la bande de 45 000 (P.a1 37 000) est absente pour les 4 souches MR. Nos résultats, qui montrent que la P.a. par sa rapidité et sa difficulté est un bon modèle d'étude pour l'analyse de l'imperméabilité membranaire et l'évolution d'une épidémie nosocomiale. Par ailleurs, les PME de P.a. jouent un rôle dans la résistance aux antibiotiques.

Contexte

Section :
Biologie moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biologie moléculaire
host icon Hôte : Université de Montréal

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Titre du colloque :

Biologie moléculaire
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