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Fixation spécifique du 3H-Prazosine aux récepteurs noradrénergiques du néocortex: conditions d'incubation

R. Briere
T.A. Reader
C. Mercier
RB

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R. Briere

Résumé du colloque

Pour l'étude des propriétés du récepteur α1 noradrénergique cortical, nous avons déterminé les conditions optimales pour la fixation spécifique de l'antagoniste 3H-Prazosine (3H-PRZ; NEN ou Amersham, 18-28 Ci/mmol). À 25°C et dans un tampon Tris-Cl 50 mM à pH 7.4, les sites sont saturés (50% de fixation) en 7.4 min avec 0.5 nM de 3H-PRZ et cette fixation spécifique pouvait être déplacée avec 10 μM soit de PRZ, soit de phentolamine. La fixation est proportionnelle à la quantité de protéines présente (entre 0.124 et 1.121 mg/ml; r = 0.990). L'analyse de la courbe de saturation a démontré que la fixation s'effectue au niveau d'un site de haute affinité (KD = 0.726 nM; Bmax= 122 fmol/ mg de protéine) avec un nombre de Hill de 0.9. L'effet des cations Ca++ et Na+ a été étudié au moyen des analyses de Scatchard-Rosenthal et de Hill afin d'obtenir des conditions de fixation qui représentent plus fidèlement les vraies interactions entre les neurotransmetteurs et les sites récepteurs postsynaptiques.

Contexte

Section :
Biologie cellulaire
news icon Thème du colloque :
Biologie cellulaire
host icon Hôte : Université du Québec à Montréal

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Titre du colloque :

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