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Résumé du colloque
L'amplification d'ADN est un phénomène biologique important qui se retrouve chez des organismes aussi différents que les parasites et les cellules de mammifères. Chez le parasite protozoaire Leishmania, l'amplification d'un plasmide H a été notée chez des lignées sélectionnées pour la résistance à différentes drogues. La caractérisation de quelques amplicons a permis de décrire deux mécanismes d'amplification d'ADN (Ouellette et al. EMBO J. 10:1009,1991). Chez des Leishmania sélectionnés pour la résistance à l'antimoine, nous avons noté l'amplification de la région H contenant le gène de la P-glycoprotéine ltpgpA. Par électrophorèse en champs pulsés nous avons démontré que tous les amplicons caractérisés étaient extrachromosomiques et circulaires. Par des expériences d'hybridation sur transfert de type Southern ainsi que par PCR nous avons déduit que les amplicons étaient générés par recombinaison homologue entre le gène ltpgpA et un autre gène de P-glycoprotéine, ltpgpB, physiquement lié. Nous avons également mis en évidence un nouvel amplicon formé de plusieurs réarrangements menant à l'élimination de régions non impliquées dans la résistance. Dans le cas de ce mutant, les réarrangements semblent également générés par recombinaison homologue entre différentes séquences répétées. Nos travaux indiquent donc que chez Leishmania les réarrangements génétiques, conduisant à l'amplification de l'ADN, sous une forme extrachromosomique, se font préférentiellement au niveau de séquences homologues.
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