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Fractionnement des membranes luminales et antiluminales des cellules endothéliales de la barrière sang-cerveau

Daniel Thauvette
Richard Beliveau
DT

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Daniel Thauvette

Résumé du colloque

La barrière hématoencéphalique formée par les cellules vasculaires du cerveau est constituée de cellules endothéliales qui forment une couche cellulaire complète et imperméable avec deux surfaces distinctes: les membranes luminales et antiluminales. Les études faites jusqu'à présent sur le transport vertical de métabolites du sang vers le cerveau ou vice-versa, ont toujours considéré la barrière sang-cerveau comme un tout. Ces cellules possèdent une polarité cavéale à la distribution de leurs enzymes types. Il est donc important de distinguer la contribution respective de chaque membrane au transport vectoriel de part et d'autre de ces cellules endothéliales. Ces membranes isolées, étudiées sous la forme de vésicules, procurent un atout essentiel pour l'étude de nombreux phénomènes. Cette étude vise à fractionner les cellules endothéliales des capillaires cérébraux afin d'étudier chaque membrane séparément. Les capillaires bovins purifiés furent traités à la collagénase de type IV afin de libérer les cellules endothéliales. Différentes méthodes de bris furent testées et la sonification s'est avérée la plus efficace. La fraction membranaire récupérée par centrifugation différentielle, fut appliquée sur des gradients continus de Percoll afin de séparer les membranes selon leur densité respective. La distribution des différentes membranes sur le gradient fut suivie à l'aide marqueurs enzymatiques spécifiques: la Na+/K+ ATPase (antiluminale) ou la γ-glutamyl transpeptidase (luminale).

Contexte

Section :
Biologie cellulaire
news icon Thème du colloque :
Biologie cellulaire
host icon Hôte : Université de Montréal

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Titre du colloque :

Biologie cellulaire
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