Colloque

Identification de C-19 stéroïdes dans la glande surrénale de cobaye par HPLC et GC/MS

Benoît Belanger

Jean Couture

Alain Belanger

Membre a labase

Benoît Belanger

Résumé du colloque

Pour confirmer la présence de différents C-21 et C-19 stéroïdes préalablement quantifiés par radioimmuno-étalonage (RIA) dans la glande surrénale de cobaye, nous avons analysé par HPLC et spectroscopie de masse reliée à un chromatographe en phase gazeuse (GC/MS) les stéroïdes extraits d'un pool de surrénales provenant de 20 cobaye. Chaque glande surrénale a été extraite à l'éther et les extraits ont été chromatographiés individuellement sur colonne LH-20. 5 fractions ont été récoltées et les échantillons de chacune de ces fractions ont été regroupés selon chaque fraction. Chacunes des 5 fractions finales a été chromatographiée sur HPLC (colonne Nova-Pack C-18), et chaque résidu stéroïde purifié isolé été analysé par GC/MS (colonne DB-17). Seule le cortisol, à cause de son instabilité sur la colonne du GC, a été directement analysé sur MS. La limite de détection des techniques utilisées est approximativement 90 nmol/kg. Les temps de rétention sur HPLC et GC, de même que le spectre de masse impliquant la présence de la prégnénolone (PREG), la progestérone (PROG), la 17-hydroxyprogestérone (17OH-PROG), l'androstènedione (DIONE), la 11-hydroxyandrostènedione (11-OH-DIONE) et le cortisol dans la glande surrénale de cobaye. Ces résultats, conjointement à une étude de stabilité, montrent que la sécrétion de C-21 et C-19 stéroïdes chez le cobaye et déterminée par RIA, confirment la présence de la DIONE et de 11ß-DIONE dans la surrénale de cobaye.

Contexte

Section :

Endocrinologie

Thème du colloque :

Endocrinologie

Hôte : Université Laval

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