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Identification de gènes spécifiquement exprimés dans le neuroépithélium de l'amphibien Ambystoma mexicanum

Ursula Busse
Johane Guay
Carl Séguin
UB

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Ursula Busse

Résumé du colloque

L'involution, au cours de la gastrulation du chordomesoderme conduit à la différenciation de l'ectoderme indifférencié en ectoderme neural ou neuroépithélium. Le développement du neuroépithélium en un tube, le tube neural, implique l'expression temporelle et spatiale d'une série de gènes spécifiques. En vue d'identifier et caractériser ces gènes, nous avons construit une génothèque d'ADN complémentaire (ADNc) correspondant aux messagers exprimés chez des neurulas (stade 16) d'Ambystoma mexicanum (axolotl). Nous avons isolé l'ARN total par la méthode du LiCl qui donnait un ARN d'excellente qualité et très bon rendement. L'ARN poly(A)+ a été purifié avec une colonne d'Oligo(dT) puis utilisé pour synthétiser de l'ADNc qui a été cloné dans le vecteur λgtll. Cette génothèque sera criblée avec des sondes d'ARN enrichies préparées à partir de neuroépithélia disséqués. Les cDNAs ainsi isolés serviront à analyser l'expression des gènes neuroépithéliaux par la technique "Northern". L'étude de l'expression de ces gènes marqueurs sera effectuée par hybridation in situ sur sections d'embryons.

Contexte

Section :
Biologie moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biologie moléculaire
host icon Hôte : Université du Québec à Montréal

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Titre du colloque :

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