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Identification des gènes induits lors de la guérison cutanée chez le cheval à l'aide de l'hybridation soustractive suppressive

Josiane Lefebvre-Lavoie
Jacques Lussier
Christine Theoret
JL

Membre a labase

Josiane Lefebvre-Lavoie

Résumé de la communication

La guérison cutanée chez le cheval mène souvent à des complications coûteuses, telle la cicatrisation excessive. En effet, le cheval est la seule espèce autre que l'homme, atteinte de chéloïde. La littérature abonde d'études décrivant des traitements possibles pour prévenir et contrôler cette fibroplasie exagérée, mais aucun n'accomplit systématiquement l'effet désiré puisque les mécanismes moléculaires de la guérison demeurent à ce jour incomplètement définis. L'hypothèse de notre étude est que la fibroplasie excessive résulte de l'expression temporo-spatiale de gènes spécifiques. L'objectif consistait à comparer l'expression génique de peau normale (PN) à celle de plaies en phase fibroblastique (PF), à l'aide de la SSH. Des plaies cutanées pleine épaisseur furent créées, à l'aide d'une technique standardisée, sur la paroi thoracique de 6 chevaux. Le bord de plaie, incluant du tissu de granulation, fut biopsié à 7 jours. Les ARN totaux de PN et PF ont été extraits, rétrotranscrits en ADNc par la trousse SMART (Clontech) puis l'expression des gènes a été comparée entre les groupes PN et PF à l'aide de la SSH (PCR-Select kit, Clontech). Les ADNc de PN ont été soustraits des ADNc de PF (PF-PN) et inversement (PN-PF). Une génothèque soustraite d'ADNc (PF-PN) a été générée puis criblée en comparant les deux populations d’ADNc soustraites. Les ADNc différentiellement exprimées ont été séquencées puis comparées dans GenBank (BLAST). Nous avons déterminé que plusieurs gènes sont différentiellement exprimés lors de la guérison normale chez le cheval, notamment celui pour la « matrix metalloproteinase 3 » (MMP-3), la hyaluronane synthase 2 (HS2) et le collagène de type 1a2, suggérant leur implication dans les mécanismes de guérison de plaies cutanées. Des études subséquentes permettront de comparer les gènes différentiellement exprimés lors de la guérison afin de mieux comprendre et traiter les situations pathologiques.

Contexte

Section :
Biochimie, biologies cellulaire et moléculaire
news icon Domaine de la communication :
Biochimie, biologies cellulaire et moléculaire
host icon Hôte : Université du Québec à Montréal

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Thème du communication :

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