Colloque

Identification d'un élément de réponse au calcitriol dans le promoteur de c-fos

G.A. Candeliere

R. St-Arnaud

Membre a labase

G.A. Candeliere

Résumé du colloque

Nous avons récemment démontré que le calcitriol (1α, 25-dihydroxyvitamine D3) stimule la transcription du proto-oncogène c-fos dans des ostéoblastes en culture. Puisque le récepteur du calcitriol agit comme facteur de transcription, ceci suggère l'interaction du complexe récepteur-ligand avec une séquence de réponse spécifique dans le promoteur de c-fos. Afin d'identifier cette séquence, nous avons construit des vecteurs reliant différentes régions du promoteur de c-fos à un gène témoin et introduit ces constructions dans des ostéoblastes traités ou non au calcitriol. Nos résultats suggèrent qu'une région sise entre -275 et -100 paires de base (pb) en amont du site d'initiation de la transcription est responsable de l'activation transcriptionnelle. Nous avons donc incubé un fragment marqué du promoteur c-fos correspondant à cette région avec des extraits nucléaires isolés d'ostéoblastes et identifié un complexe DNA-protéine spécifique dans les extraits induits au calcitriol. En utilisant un "footprinting assay", nous avons identifié la séquence liée par la protéine entre -178 et -144 pb. Nous avons donc sous-cloné cette région devant un promoteur hétérologue et les indications préliminaires montrent que cette région est suffisante pour induire l'expression du gène témoin en présence de calcitriol. De plus, l'addition de calcitriol in vitro à des extraits nucléaires non-induits est suffisante pour induire la liaison du complexe à sa séquence-cible. Ces travaux suggèrent que nous avons identifié un site fonctionnel de réponse au calcitriol dans le promoteur de c-fos.

Contexte

Section :

Biochimie, biologie moléculaire

Thème du colloque :

Biochimie, biologie moléculaire

Hôte : Université du Québec à Rimouski

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Titre du colloque :

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