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Implication de la p15E dans la polarisation d'un rétrovirus murin : effets sur la pathogénèse et la transmission chez la souris

Julie Deschambeault
Guy Lemay
Eric A. Cohen
JD

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Julie Deschambeault

Résumé du colloque

La relâche polarisée virale est prédominante chez les rétrovirus, tel que le VIH, HTLV et MuLV, qui bourgeonnement principalement du côté basolatéral de cellules épithéliales polarisées. Afin de vérifier l’importance de la relâche polarisée dans un contexte in vivo, le virus Cas-Br-E, qui est un rétrovirus murin transmissible sexuellement pouvant causer une leucémie et une paralysie chez la souris sera utilisé dans ces études. Tout d’abord, des mutations ont été introduites dans le signal YXXL intracytoplasmique de la protéine d’enveloppe en substituant la tyrosine (Y) par une sérine (S), en délétant cette tyrosine ou en introduisant un codon stop prématuré. Ces mutants ont par la suite été testés dans les cellules MDCK (Madin-Darby canine kidney) pour vérifier la polarisation virale. Des cellules NIH 3T3 ont aussi été transfectées et maintenues en culture pour produire des cellules chroniquement infectées. L’évolution de la chronicité est suivi en testant la présence du niveau de réverse transcriptase virale à chaque 6 jours. Également, un test de formation de syncytium sur cellules XC, nous permet de déterminer le titre de chacun des virus produit des NIH 3T3 chroniquement infectées. Enfin, les différents virus produits sont utilisés pour réinfecter de nouvelles NIH 3T3 afin de vérifier par séquençage si les mutations introduites ne révertent pas lors de la propagation virale. Une fois toutes ces vérifications effectuées, des souriceaux nouveaux-nés seront inoculés et observés pour l’apparition d’une vérimie (test ÉLISA) et de signes de maladie. Des mâles infectées seront ensuite accouplés avec des femelles non-infectées pour voir l’effet de la polarisation virale dans la transmission et la pathogénèse chez la souris.

Contexte

Section :
Microbiologie, virologie
news icon Thème du colloque :
Microbiologie, virologie
host icon Hôte : Université Laval

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Titre du colloque :

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