Colloque

Influence des sites apuriniques sur la transcription in vitro

M. D. Mamei-Bratley

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M. D. Mamei-Bratley

Résumé du colloque

Des sites apuriniques, produits suite à l'alkylation du bactériophage T7, sont la cause de la létalité retardée. Pour mieux comprendre le mécanisme de cette létalité, nous étudions l'effet de sites apuriniques sur la transcription. Le DNA purifié du bactériophage T7 est incubé pendant des temps variables (0-6 heures) en présence de l'acide acétique 0.01M, pH 4, 25°C. Les sites apuriniques dans le DNA sont dénombrés par sédimentation du DNA alcalin dans des gradients de saccharose. Le DNA traité est ensuite employé comme matrice pour la synthèse du RNA in vitro (en présence de la RNA polymérase d'Escherichia coli). La vitesse de synthèse du RNA est diminuée quand le DNA matrice contient des sites apuriniques. Cette perte d'activité est environ 40 fois plus grande que la perte observée après alkylation du DNA matrice. Ce résultat est en accord avec l'observation que la dépurination est plus importante que l'alkylation dans la létalité des bactériophages.

Contexte

Section :

Biochimie

Thème du colloque :

Biochimie

Hôte : École polytechnique de Montréal

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Titre du colloque :

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