Colloque

Ingénierie Génétique: Clonage des Gènes de Métallothionéine

M. Mbikay

J.P. Thirion

I.B. Matti

C. Marengo

Membre a labase

M. Mbikay

Résumé du colloque

Les métallothionéines (MT) sont des protéines de poids moléculaire variant entre 8,000 et 10,000, capables de lier les métaux lourds (Ag, Au, Cd, Hg, Zn) et dont la synthèse est inductible par ces métaux. Nous avons identifié trois types de MT induites par le Cd dans le foie et le rein de souris. Dans les cellules cultivées de fibroblastes de souris, seul un de ces types est inductible. Par étude de la régulation des gènes codant pour ces MT, nous avons entrepris de les cloner. A partir du foie de souris injectée avec du Cd, nous avons purifié l'ARN messager des MT, par chromatographie sur colonne d'oligo (dT) cellulose et par fractionnement sur gradient de sucrose. Dans un système de traduction, cet ARN stimule la synthèse de protéines exhibant les caractéristiques suivantes des MT: 1) elles sont riches en cystéine et dépourvues de leucine; 2) elles ont une forte affinité pour les ions de cobalt et de sélénium; 3) elles sont coluées avec la MT pure sur colonne de Sephadex G75; 4) elles corrigent avec elle sur gel d'acrylamide au SDS. Nous avons préparé des cDNA à partir de cet ARN messager pour les introduire dans un plasmide et les propager dans E. Coli.

Contexte

Section :

Biochimie et biologie cellulaire

Thème du colloque :

Biochimie et biologie cellulaire

Hôte : Université de Sherbrooke

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Titre du colloque :

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