Communication

Interaction de l'hémoglobine avec des matériaux polysaccharidiques à base d'agarose

Karima Abdesslem

Mircea-Alexandru Mateescu

Membre a labase

Karima Abdesslem

Résumé de la communication

L'hémoglobine est le principal transporteur d'oxygène. C'est une chromoprotéine qui présente des interactions sélectives avec des matériaux chromatographiques à base de polysaccharides. Des travaux précédents ont relevé l'existence d'interactions spécifiques entre l'hémoglobine (Hb) et des films d'agarose (28,26 mm2 et épaisseur entre 40 mm et 60 mm). L'étude des constantes d'affinité (Kd) et de liaison maximale (Bmax) a montré que cette interaction est en fonction des concentrations des films d'agarose et des concentrations d'Hb. Les films d'agarose 2 % lient plus d'Hb (1055 mg/film) par rapport aux films 1 % (451 mg/film) et 0,5 % (180 mg/film). Par contre, on note une diminution de l'affinité avec l'augmentation de la concentration des films et cela est probablement relié à une plus grande rétention d'eau des films 2 % et 1 % par rapport à 0,5 %. Les résultats des études comparées d'interaction de l'Hb glycosylée et non glycosylée, révèlent in vitro des différences entre l'Hb normale et celles modifiées. Ces dernières présentent très peu d'interaction avec les films (51 mg/film pour Hb glucosylée et 23 mg/film pour l'Hb lactosylée). L'objectif du présent projet est de mieux élucider le mécanisme d'interaction des formes normales et pathologiques de l'Hb avec des polysaccharides à base d'agarose. Les interactions spécifiques pourraient permettre d'envisager des méthodes de laboratoire pour le diagnostic des hémoglobinopathies. Différemment de l'étude précédente sur des films, l'étude actuelle repose sur l'interaction de l'Hb normale et modifiée avec du matériel chromatographique à base d'agarose (colonne de Superose 12). Des microcolonnes (0,25 ml lit de gel) ont été chargées avec des quantités de 0 mg; 0,25; 0,5; 1; 2,5 et 5 mg d'Hb. L'incubation était faite pendant une durée d'une heure. L'élution déformante de l'hémoglobine retenue a été réalisée par une solution de NaCl 0,9 %. Les résultats obtenus montrent une rétention plus élevée de l'Hb normale par rapport à l'Hb glycosylée. Ainsi l'Hb normale est retenue en totalité sur le matériel chromatographique, soit d'une quantité de 4,923 mg, tandis que l'Hb glucosylée et lactosylée étaient retenues en moindres quantités (3,871 mg et 3,207 mg respectivement). En effet, cette différence de comportement de l'Hb modifiée est due à la glycosylation. L'étude se poursuit sur d'autres types d'Hb en vue de mieux comprendre le mécanisme d'interaction de l'Hb avec ces matériaux à base de polysaccharides.

Contexte

Section :

Biochimie, biologies cellulaire et moléculaire

Domaine de la communication :

Biochimie, biologies cellulaire et moléculaire

Hôte : Université de Montréal

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