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Isolation, caractérisation et séquence d'une entérotoxine thermostable de Escherichia coli d'origine porcine

R. Lallier
M. Chrétien
M. Gendreau
S. St-Pierre
F. Bernard
C. Lazure
N. Seidah
RL

Membre a labase

R. Lallier

Résumé du colloque

Nous décrivons l'isolation, la purification et la caractérisation chimique de l'entérotoxine thermostable (ST) produite par la bactérie E. coli. Cette colline bactérienne provient de la souche F11 (P155) d'origine porcine. L'entérotoxine a été produite dans un fermenteur de 9 litres, sous agitation et aération forcée, dans un milieu contenant du glucose à 0,2, à 1, et 7,5%, pendant 7 heures. Après centrifugation des bactéries, ST a été précipité par addition, à 40°C, de sulfate d'ammonium saturé, jusqu'à saturation. La toxine a été ensuite débarrassée de ses principaux contaminants par ultrafiltration et par filtration sur gel de polyacrylamide P4. Le matériel résultant a été purifié jusqu'à homogénéité au moyen d'opérations successives de chromatographie liquide: à haute performance avec des colonnes de perméation et d'échange d'acides. Après caractérisation chimique par analyse d'acides aminés et détermination de sa séquence, nous avons démontré que ST est l'octadécapeptide suivant: Asn-Thr-Phe-Tyr-Cys-Cys-Glu-Leu-Cys-Cys-Asn-Pro-Ala-Cys-Ala-Gly-Cys-Tyr, qui contient trois ponts disulfure. La position des ponts reste à déterminer.

Contexte

Section :
Biochimie
news icon Thème du colloque :
Biochimie
host icon Hôte : Université du Québec à Montréal

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