Colloque

Isolement des cellules intestinales de la souris

M. Lupien

J.S. Hugon

Membre a labase

M. Lupien

Résumé du colloque

La 1ère partie du jéjunum est prélevée sur 3 cm chez des souris adultes mâles de race suisse ICR. Le fragment est éversé sur un tube de polyéthylène. Une solution de NaCl 0.9% est instillée côté séreux. Le boudin ainsi formé est plongé dans une solution tampon, oxygéné, contenant 10 mM EDTA. La préparation est vibrée 1 min. toutes les 5 min. Toutes les 15 min. le contenu de cellules détachées est récupéré par centrifugation à 900 g et lavé 2 fois dans une solution de Hanks glucosée. La viabilité des cellules est estimée par le Trypan Bleu ou la Nigrosine. Elles sont ensuite fixées au glutaraldéhyde 3% en tampon phosphate pour 30 min, postfixées en OsO4 2%, déshydratées et enrobées en Epon. Les prélèvements ont lieu après 30, 45, 60, 75 et 90 min. de vibration. La morphologie restante est fixée en Bouin aqueux. Les résultats obtenus montrent que les cellules de la villosité se détachent pendant les 15 premières 60 min, celles de la crypte, après 60 et 90 min. La viabilité de toutes les cellules isolées est d'environ 50%. Elle est meilleure pour celles restant en feuillet. La morphologie ultrastructurale des cellules isolées montre un aspect arrondi avec distension de la zone apicale et effacement des microvillosités. La rupture des complexes jonctionnels apicaux se fait du côté cytoplasmique entraînant la déchirure des cellules voisines.

Contexte

Section :

Pathologie et histologie

Thème du colloque :

Pathologie et histologie

Hôte : Université de Sherbrooke

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