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Isolement du gène codant pour la protéine principale de la capside de virus de l'iridula iridescent

Shahragim Tajbakhsh
Peter E. Lee
Verner L. Selig
ST

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Shahragim Tajbakhsh

Résumé du colloque

Le virus Tipula iridescent (TIV) est icosaédrique (130 nm) et possède un génome formé d'ADN bicaténaire (~200kbp). Comme le 'Frog Virus 3' et le 'Fish Lymphocystis Disease Virus', il appartient à la famille des Iridoviridae. Il forme des inclusions intracytoplasmiques dans les cellules des insectes parasités. L'objet de notre étude est l'expression et l'organisation du génome TIV. Nous utilisons les techniques du génie génétique pour caractériser le gène codant pour la protéine principale de la capside du TIV (~50kDa). L'étude de l'expression se base sur les techniques 'western' d'immunofluorescence et 'polyclonal' d'anticorps polyclonaux. Afin d'isoler le gène, nous avons identifié l'ARN messager de TIV le plus abondant dans la phase tardive du cycle. Pour cela, l'ARN viral total a été isolé des cellules infectées d'Estigmène et divers Adénosines ont été déterminées après incubation (4,8,12,18 et 24h). Les ADN complémentaires (ADNc) correspondants ont été synthétisés et chacun des ADNc ont été hybridées avec des fragments d'ADN viral digéré. Après analyse des intensités d'hybridisation, un fragment de 3kb de TIV fut identifié. Ce fragment (4.4kbp) a été cloné dans M13 mp19. Ce clone, qui donne un produit de fusion avec la β-galactosidase, est en cours de caractérisation par l'expression et la séquence.

Contexte

Section :
Microbiologie, virologie et immunologie
news icon Thème du colloque :
Microbiologie, virologie et immunologie
host icon Hôte : Université d’Ottawa

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Titre du colloque :

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