Colloque

La déformation et le remodelage de l'actine F sous l'action de forces de l'ordre du nanonewton

Louise Guolla

Andrew Pelling

Membre a labase

Louise Guolla

Résumé du colloque

La littérature actuelle suggère que les forces mécaniques que subissent les cellules sont transmises vers l’intérieur de la cellule via le cytosquelette. Le but de cette étude est d’explorer la réponse cellulaire dans le temps suite à l’application d’une force ponctuelle sur la surface d’un fibroblast. Un microscope à force atomique (AFM) a été utilisé pour appliquer une force constante sur la surface de fibroblastes 3T3 dont l'actine F a été préalablement transfecté avec EGFP. La réponse a été imagée par microscopie confocale à balayage laser (LSCM) à haute vitesse. Les déplacements des filaments d’actine ont été suivis dans le temps pour plusieurs valeurs de forces (0nN, 5nN, 10nN, 20nN). On a observé un déplacement après seulement 20 secondes. Pour déterminer quels éléments du cytosquelette (actine et microtubules) sont impliqués dans le réponse nous avons utilisé du nocodazole et un inhibiteur ROCK (Y27632). Seulement une concentration de 10µM de nocodazole suffit à éliminer largement le déplacement visible à 20nN, indiquant l’importance des microtubules pour la transmission de la force. Une double transfection de l’actine-EGFP et le zyxine-mRFP a été utilisé pour corréler le mouvement des complexes d’adhésion focal aux bords des cellules qui rétractaient avec le déplacement des filaments d’actine. Ceci montre qu’il existe une réponse immédiate à la force appliquée et que celle-ci n’est pas uniforme à travers le cytosquelette de la cellule.