pen icon Colloque
quote

La dissémination des gènes de résistance aux antibiotiques chez les bactéries: l'implication et le mécanisme utilisé par les intégrons

Annie Gravel
Paul H. Roy
AG

Membre a labase

Annie Gravel

Résumé du colloque

La dissémination des gènes de résistance aux antibiotiques est un problème très important de nos jours; tant du point de vue clinique que du point de vue fondamental. On connaît présentement trois mécanismes responsables de cette dissémination: les plasmides, les transposons et plus récemment, les intégrons. Les intégrons sont des éléments d'ADN mobiles constitués de deux segments conservés, les segments 5' et 3', encadrant un segment central variable. Ces éléments d'ADN sont ainsi capables d'acquérir une grande variété de gènes de résistance aux antibiotiques différents, conférant ainsi une résistance multiple à un hôte bactérien, et ce, sans l'intervention de transposons ou de plasmides. Une recombinaison spécifique de site, l'intégrase, serait responsable de l'intégration de l'élément 3' de l'intégron. Nous avons démontré que l'intégrase de l'intégron de type 1 (GTTTgPuPuPy) par premier localisé en 5' de chaque gène de résistance et que l'intégration implique l'existence d'une séquence d'attachement spécifique sur le chromosome bactérien. À l'aide de l'intégron Tn2424 et d'un mutant de l'intégrase, nous avons démontré que l'intégron PSI sous le contrôle du promoteur antisens de l'intégrase, l'intégrase est surproduite cytoplasmique, nous avons observé, par PCR inverse, l'excision et le réarrangement des cassettes de résistance dans l'intégron Tn2424 ainsi que l'élimination et l'augmentation de la taille du clone original par une longueur égale à la cassette excisée. Nous avons également surproduit l'intégrase en utilisant le plasmide des vecteurs d'expression procaryotes pET et pMAL-c2. Nous avons observé que l'intégrase représente jusqu'à 50% des protéines totales solubles et est surproduite dans les vecteurs pET et pMAL-c2. Des observations concernant la formation de corps d'inclusion dans le cas des vecteurs pET et l'emploi de détergents à sodium sarcosylate pour solubiliser les protéines. Nous avons purifié les protéines sur des colonnes de gel et les vecteurs à l'aide de sarcosyl afin de faire des expériences de gel et d'électrophorèse de liaisons protéines-ADN. Par contre, nous n'avons pas pu faire la cristallographie de l'intégrase de pYS1.

Contexte

Section :
Biochimie, biologie moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biochimie, biologie moléculaire
host icon Hôte : Université du Québec à Montréal

Découvrez d'autres communications scientifiques

news icon

Titre du colloque :

Biochimie, biologie moléculaire
Effets de différents acides gras sur la masse intracellulaire et l'activité du récepteur LDL in vit…
Sophie Clermont
Expression et régulation du transporteur de glucose des capillaires cérébraux
Jean-François Pouliot
La dissémination des gènes de résistance aux antibiotiques chez les bactéries: l'implication et le …
Annie Gravel
Voir tous les contenus de ce colloque

Autres communications du même congressiste :

news icon

Thème du colloque :

Biochimie, biologie moléculaire
L'intégron et la dissémination des gènes de résistance aux antibiotiques : la liaison de l'intégras…
Annie Gravel
L'intégron et la dissémination des gènes de résistance aux antibiotiques : la liaison de l'intégras…
Annie Gravel
La dissémination des gènes de résistance aux antibiotiques chez les bactéries: l'implication et le …
Annie Gravel