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Résumé du colloque
Les PI3kinases sont des enzymes qui jouent un rôle crucial, quoique partiellement caractérisé, dans différentes fonctions cellulaires du neutrophile humain. La PI3Kgamma (p110g) est un nouveau membre de cette famille et des données indirectes suggèrent qu'elle est impliquée dans la voie de signalisation du fMLP et de l'IL-8. Nous avons développé un anticorps immunoprécipitant spécifique contre la p110g pour mieux comprendre la cascade d'activation via ces agonistes en tentant de mesurer par un essai kinase une forme activée de la p110g. Nos données indiquent qu'il existe probablement deux formes protéiques de cet enzyme chez le neutrophile humain; nous n'avons pu toutefois retrouver d'épissage alternatif avec deux sondes différentes. Nous avons par la suite démontré avec un essai kinase que la p110g, mais pas les p85/PI3K, devient activée rapidement suite à une stimulation au fMLP ou à l'IL-8 pour retourner à un état basal en moins d'une minute. La stimulation de l'activité de la p110g par le fMLP est inhibée par la wortmannine. Pour s'assurer que ces réponses impliquaient réellement un récepteur couplé aux protéines G, nous avons aussi inhibé notre activité lipidique avec la toxine pertussique. Nous avons aussi pu démontrer que la p110g est effectivement transloquée à une fraction membranaire suite à une stimulation au fMLP. La démonstration de la stimulation de l'activité de la p110g par deux facteurs chimiotactiques distincts souligne l'importance de continuer à essayer de mieux cerner le rôle que cet enzyme joue dans les cascades signalétiques.
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