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Résumé du colloque
Les dimères cyclobutyliques entre les bases pyrimidiques sont les lésions majeures induites dans l'ADN par la radiation UV-B. L'ADN photolyase est une enzyme qui catalyse la réparation de ces dimères en utilisant la lumière UV-Vis. L'ADN photolyase étudiée est celle de la levure Saccharomyces cerevisiae dont la séquence de gène de 1.7 KB est déjà connue. Ce gène de photolyase (PHR1) est situé dans le plasmide pKX223-3, ce qui permet une amplification de l'expression du gène. Une cellule mutante de E. coli (CSR603, F', PHR1), transformée avec le plasmide modifié, produit ainsi un montant élevé de l'ADN photolyase de levure. L'enzyme purifiée est caractérisée par la présence de deux co-enzymes qui fonctionnent comme chromophores dans la photoactivation. Les deux co-enzymes sont le 1,5 dihydroflavine adénine nucléotide et le 5,10-méthenyl tétrahydrofolate. La fonction de ces deux chromophores dans le mécanisme photochimique de l'ADN photolyase est étudiée par le spectre de fluorescence et le rendement quantique de la réaction et de leur dépendance du pH.
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