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L'anticorps monoclonal CC-3, un outil unique pour étudier les phosphoprotéines mitotiques

Alexandra Albert
Sébastien Lavoie
Michel Vincent
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Alexandra Albert

Résumé du colloque

L'anticorps monoclonal CC-3, produit dans notre laboratoire, a permis de définir une isoforme hyperphosphorylée de la grande sous-unité de l'ARN polymérase II impliquée dans la transcription et dans l'épissage. CC-3 reconnaît principalement cette protéine dans des homogénats totaux de cellules interphasiques via un épitope phosphorylé. Toutefois, dans un homogénat de cellules en mitose, plus d'une vingtaine de phosphoprotéines différentes sont révélées par cet anticorps. L'entrée des cellules en mitose est provoquée par le MPF (cdk1/cycline B) qui phosphoryle plusieurs protéines régulatrices et structurales permettant le démantèlement des structures interphasiques pour l'établissement des activités propres à la mitose. Quelques-uns de ces substrats sont connus mais la plupart restent à identifier. La disponibilité de CC-3, reconnaissant une sous-population de protéines spécifiquement phosphorylées en mitose, a donc été exploitée en ce sens. Les résultats en immunofluorescence montrent que, en plus d'un fort marquage cytoplasmique général, ces protéines localisent dans des structures importantes pour la mitose comme l'échafaudage chromosomique, le fuseau mitotique, les centrosomes et le corps intermédiaire. Deux de ces protéines ont été identifiées jusqu'ici soit la grande sous-unité de l'ARN polymérase II et la topoisomérase II. Les recherches sont faites en parallèle avec un autre anticorps monoclonal commercial reconnu pour marquer fortement les cellules mitotiques en plus de révéler aussi une multitude de phosphoprotéines mitotiques dont la topoisomérase II. Ces expériences sont importantes afin d'identifier les protéines qui semblent directement reliées à la régulation et à la poursuite de la mitose.

Contexte

Section :
Biologie cellulaire
news icon Thème du colloque :
Biologie cellulaire
manager icon Responsables :
Alan Anderson
host icon Hôte : Université Laval

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Titre du colloque :

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