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Le cotransporteur sodium/phosphate est un complexe multimérique possédant différents états d'oligomérisation

Marc Jette
Richard Beliveau
Michel Potier
Sylvie Giroux
MJ

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Marc Jette

Résumé du colloque

La technique d'inactivation par les radiations a été utilisée afin de mesurer la taille moléculaire du transporteur de phosphate (Pi) des tubules proximaux du rein. Cette méthode permet de déterminer la taille moléculaire comprenant toutes les sous-unités protéiques impliquées dans l'activité biologique. Suite à l'irradiation à des doses croissantes de cobalt 60, l'activité résiduelle des enzymes étudiées est mesurée. La logique de l'analyse nous permet de relier perte d'activité biologique à la taille moléculaire des enzymes et/ou des transporteurs étudiés. L'utilisation de vésicules membranaires de tubule rénal a permis de mesurer l'activité du transporteur de Pi dans les milieux intra- et extra-vésiculaires, et il est ainsi possible de recréer séparément chacune des forces électromotrices impliquées dans le transport du Pi. En présence d'un gradient de Pi comme seule force électromotrice, la taille moléculaire du transporteur est de 62 kDa. En ajoutant un gradient de proton allant de l'intérieur vers l'extérieur des vésicules, la taille moléculaire mesurée est de 124 kDa. Finalement, en présence d'un gradient de sodium et de Pi, une taille de 234 kDa est obtenue. Afin de vérifier si l'irradiation ne porte pas atteinte à l'intégrité des membranes, des cinétiques initiales du transport de Pi ont été effectuées avec des vésicules irradiées à 0 et 5 Mrad. Pour chacune des conditions, la captation du phosphate par les vésicules irradiées et l'activité mesurée initiales ne sont pas modifiées sous ces conditions. Ces résultats suggèrent que le transporteur de Pi est formé de monomères de 62 kDa, lesquels peuvent exister sous forme mono-, di-, ou tétramérique en équilibre dans la membrane.

Contexte

Section :
Biochimie, biologie moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biochimie, biologie moléculaire
host icon Hôte : Université du Québec à Montréal

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Titre du colloque :

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