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Le rôle de la topoisomérase I durant l'élongation de la transcription des opérons rrn chez Escherichia coli

CH

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Chadi Hraiky

Résumé de la communication

Chez E. coli, le rôle principal de la topoisomérase I est attribué à la relaxation du surenroulement négatif global introduit par la gyrase. Or, selon le "twin domain model", le déplacement de l'ARN polymérase durant la transcription génère du surenroulement positif et négatif respectivement en avant et en arrière du complexe transcriptionnel, d'où le rôle important des topoisomérases durant l'élongation de la transcription. En se basant sur ce modèle, nos travaux suggèrent que le rôle essentiel de la topoisomérase I serait plutôt de relaxer le surenroulement négatif généré durant l'élongation de la transcription. Ceci a pour but de prévenir la formation des hybrides ARN-ADN ("R-loops") pouvant être générés derrière le complexe transcriptionnel à cause du surenroulement négatif qui favorise la séparation des deux brins d'ADN. Ces hybrides ARN-ADN sont responsables de la difficulté qu'ont les mutants topA (codant pour la TopoI) à croître. Ce phénotype est corrigé partiellement par la surproduction de la RNase H, une enzyme qui dégrade la partie ARN d'un hybride ARN-ADN. Nous avons procédé par un marquage à l'U-H3 des ARNrs ainsi qu'à des extensions d'amorces pour montrer une correlation entre la formation des R-loops et l'inhibition de la croissance en absence de la topoisomérase I. Des Northern blots étaient nécessaires pour montrer les conséquences de la formation de telles structures sur la production ARNrs (produits des opérons rrn). Nos résultats montrent une diminution de la synthèse des ARNrs faisant suite à un blocage transcriptionnel causé par la formation de "R-loops". La surproduction de la RNase H corrige cette inhibition. Ces résultats supportent l'hypothèse que le rôle principal de la topoisomerase I est de relaxer le surenroulement négatif généré durant la transcription des opérons rrn afin de prévenir la formation des "R-loops".

Contexte

news icon Domaine de la communication :
Biochimie, biologies cellulaire et moléculaire
host icon Hôte : Université de Montréal

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