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Les effets du tri-n-butylétain sur l'homéostasie du calcium et sur le pH dans les hépatocytes de rats

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Mélanie Grondin

Résumé de la communication

L’homéostasie du calcium est importante pour la cellule. Des modifications de celle-ci peuvent altérer la fonction mitochondriale et modifier les voies de signalisation cellulaire. Ces modifications peuvent promouvoir la mort cellulaire par apoptose. Le TBT (tri-n-butylétain) est un toxique environnemental très répandu et très nocif. Des études antérieures ont démontré que le TBT pouvait causer une hausse de concentration du calcium intracellulaire sur des hépatocytes de truite arc-en-ciel. Ces résultats nous ont amenés à poser l’hypothèse que la perturbation du calcium intracellulaire par le TBT contribue à la signalisation pro-apoptotique dans les hépatocytes. Pour confirmer cette hypothèse, des expériences ont été réalisées sur des cultures primaires d’hépatocytes de rat exposés au TBT. Les changements calciques ont été observés grâce à une sonde fluorescente (Fluo3). La fluorescence a été mesurée par cytométrie de flux et microscopie confocale. Les résultats en cytométrie de flux montrent que, lorsque les hépatocytes sont exposés à des concentrations de TBT connues pour causer l’apoptose (3.5 µM), la fluorescence totale de la cellule ne semble pas être modifiée. Mais, lorsque la fluorescence est suivie en microscopie confocale, on remarque un déplacement de la fluorescence d’un compartiment sub-cellulaire vers le cytoplasme. Pour déterminer la nature du compartiment subcellulaire, la thapsigargine et une sonde, la 3,3'-dihexyloxacarbocyanine iodide ou DiOC6(3), marquant le réticulum endoplasmique seront utilisées. Le pH sera aussi suivi, avec la sonde SNARF-1, en cytométrie, en fluorimétrie et en microscopie confocale.

Contexte

news icon Domaine de la communication :
Biochimie, biologies cellulaire et moléculaire
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