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Les gènes d'empreinte génétique parentale : Étude de la corrélation entre l'asynchronie de réplication et la transition R/G

Mohamed Boutouil
Claude-Lise Richer
Nicole Lemieux
Mohamed Boutouil
Raouf Fetni
Patrick Scott
MB

Membre a labase

Mohamed Boutouil

Résumé du colloque

La transition R/G marque le passage de la phase S précoce à la phase S tardive. Ce passage survient durant la phase de synthèse de l'ADN lorsque la cellule a terminé la réplication des bandes R et qu'elle se prépare pour la réplication des bandes G et C. Un marquage dynamique (aussi appelé marquage de réplication) peut être produit en bloquant la synthèse de l'ADN à la transition R/G et en incorporant le BrdUrd (5-bromo-2'-désoxyuridine) soit dans l'ADN synthétisé avant le blocage, soit dans l'ADN synthétisé après la relâche du blocage. Ce marquage est révélé en détectant le BrdUrd par la méthode Fluorochrome-Photolyse-Giemsa ou par la méthode immunocytochimique (anticorps anti-BrdUrd). La complémentarité et la congruence des différents marquages dynamiques obtenus démontrent que si le site de blocage est la transition R/G, le BrdUrd est incorporé uniquement durant la phase S précoce (bandes R) ou uniquement durant la phase S tardive (bandes G et C), jamais durant les deux phases. Ainsi le temps de réplication (précoce vs tardif) d'une bande peut être déterminé. La discordance cytogénétique entre deux bandes dynamiques homologues peut résulter d'une asynchronie dans la réplication de ces deux bandes. Kitsberg et al. (Nature 364:459, 1993) ont étudié des gènes qui ont une empreinte génétique et ont montré que l'allèle paternel se réplique plus précocément que l'allèle maternel. Cette asynchronie de réplication avait été observée cytogénétiquement pour la bande 15q11.2 par Izumikawa et al. (Hum Genet 87:1, 1991). Nous avons comparé la discordance entre bandes chromosomiques homologues pour a) 4 loci ou régions (6q26, 11p13, 11p15.5 et 15q11.2-12) contenant au moins un gène ayant une empreinte parentale, et b) 10 régions ne contenant pas de gènes ayant l'empreinte. Nous avons étudié 50 paires de chromosomes à haute résolution obtenus après blocage à la transition R/G et incorporation tardive du BrdUrd. Le taux de discordance n'était pas plus élevé pour les bandes contenant des gènes avec empreinte parentale que pour les bandes contrôles. En conclusion, l'asynchronie de réplication survient avant ou après la transition R/G mais ne la traverse pas.

Contexte

Section :
Biologie cellulaire et moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biologie cellulaire et moléculaire
host icon Hôte : Université McGill

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Titre du colloque :

Biologie cellulaire et moléculaire
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