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Localisation radioautographique in vitro et caractérisation des récepteurs β-adrénergiques dans l'hypophyse de lapin

Sarah Schmichovitsch
Lynda Williams
Michele Tosczuk
Nicole Follea
Georges Pelletier
SS

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Sarah Schmichovitsch

Résumé du colloque

Les récepteurs β-adrénergiques sont impliqués dans la régulation de la fonction mélanotrope de l'hypophyse. Nous avons utilisé une méthode de visualisation radioautographique pour localiser et caractériser les récepteurs dans l'hypophyse de lapin. Les coupes à congélation (20 µm) sont incubées en présence de cyanopindolol I¹²⁵, ligand présentant une affinité identique pour les deux sous types β₁ et β₂ de récepteurs adrénergiques. Le marquage est localisé par radioautographie au moyen d'un film à rayon X exposé sur les coupes, puis d'une émulsion déposée sur les coupes après fixation du tissu. L'inhibition de la liaison du CYP I¹²⁵ par addition de concentrations croissantes de ligands β-adrénergiques permet de caractériser les récepteurs. Les courbes de compétition sont obtenues soit après comptage de la radioactivité liée sur des coupes recueillies sur filtre, soit après lecture densitométriques des films à rayon X. Les résultats obtenus indiquent que les récepteurs sont en majorité de sous type β₂, avec une affinité apparente (Kd) d'environ 0.01 nM et principalement concentrés dans le lobe intermédiaire bien qu'un marquage diffus soit observé dans le lobe antérieur.

Contexte

Section :
Endocrinologie
news icon Thème du colloque :
Endocrinologie
host icon Hôte : Université de Montréal

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Titre du colloque :

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