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L'utilisation de l'interleukine-2 dans les cultures de lymphocytes permet l'obtention d'un grand nombre de mitoses pour les études cytogénétiques à haute résolution

Mohamed Boutouil
Mohamed Boutouil
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Mohamed Boutouil

Résumé du colloque

L'Interleukine-2 (IL-2) est un facteur de croissance connu pour son effet promoteur sur la progression du cycle cellulaire des lymphocytes T (de G1 à S), sur la stimulation de la réplication de l'ADN et de la mitose. Les techniques cytogénétiques standards sont basées sur les cultures cellulaires qui permettent d'obtenir des mitoses nécessaires à l'analyse chromosomique. Nous avons effectué une étude de l'effet de l'IL-2 sur les cultures de routine cytogénétique des lymphocytes du sang périphérique et les paramètres que nous avons choisis pour évaluer cet effet sont: l'index mitotique (nombre de mitoses/nombre total de cellules), et le niveau de résolution des mitoses obtenues (nombre de bandes chromosomiques par génome haploïde). Des échantillons de sang périphérique provenant de 10 individus normaux ont été collectés pour les fins de cette étude. Nous avons effectué une étude en comparant les cultures cellulaires en présence et en absence d'IL-2 et la dose optimale a été déterminée à l'intérieur d'une fourchette de 200 à 1600 U en étudiant l'index mitotique et le niveau de bandes chromosomiques (divisées en 4 groupes: <450; 450-649; 650-850;>850 bandes). Nous avons étudié l'effet de l'IL-2 sur les cultures lymphocytaires de 72 heures et de 96 heures après synchronisation cellulaire (blocage des cellules au niveau de la phase de synthèse de l'ADN à l'aide d'une forte concentration de thymidine). Lorsque l'IL-2 est ajouté au milieu de culture un plus grand nombre de mitoses ont été récoltées, en effet, nous avons obtenu un index mitotique variant entre 10 et 15 mitoses par 100 cellules vivantes, et une résolution des chromosomes montrant plus de 800 bandes (chromosomes longs). Ainsi l'analyse par hybridation génomique comparative des aberrations chromosomiques et l'identification des anomalies de structures chromosomiques telles que les petites déletions et translocations sera facilitée.

Contexte

Section :
Biologie cellulaire et moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biologie cellulaire et moléculaire
host icon Hôte : Université McGill

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Titre du colloque :

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