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L'utilisation simultanée des tampons Hepes et Hanks dans la préparation de leucocytes humains pour observation au SEM

M.-R. Corvellec
L. Pelletier
E.D. Lalague
G.H. Cousineau
C. Derghazarian
S. Havrineck
MC

Membre a labase

M.-R. Corvellec

Résumé du colloque

L'examen au SEM de l'architecture de plusieurs échantillons de leucocytes humains, préparés dans les tampons-fixateurs Hanks (Ha)-glutaraldéhyde (G CHO), Hepes (He)-G CHO ou Ha-He-G CHO, a été effectué. Les observations suivantes ont été notées: (i) l'utilisation du milieu de suspension Ha est nettement supérieure comme véhicule de fixation, malgré que le pH initial (7.4) du milieu Ha-cellules peut varier de 0.4 unités après l'addition de Ha-G CHO. Toutefois, le pH du milieu de fixation He-cellules G CHO demeure stable même après 30 min; (ii) l'addition du zwitterion He au tampon Ha maintient non seulement de façon très adéquate l'architecture externe des leucocytes mais aussi le pH initial et (iii) dans tous les cas à près d'une des ions Ca++ et Mg++ est essentielle à l'intégrité cellulaire. Malgré que l'emploi de Ha-G CHO est acceptable il semble raisonnable d'assurer qu'une bonne préservation de l'architecture cellulaire doit être reliée aux conditions qui maintiennent un pH normal au moment de la fixation, et que le fixateur doit rejoindre une cible non perturbée. L'addition de He à Ha-G CHO semble réaliser un tel but.

Contexte

Section :
Biologie cellulaire
news icon Thème du colloque :
Biologie cellulaire
host icon Hôte : Université du Québec à Montréal

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