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Résumé du colloque
Les cellules de carcinome embryonnaire P19 sont dites pluripotentielles, c'est-à-dire qu'elles peuvent se différencier en types cellulaires variés. Cette différenciation peut être réalisée in vitro en modifiant la composition du milieu de culture. Les cellules P19 constituent donc un système utile pour étudier in vitro la maturation d'un précurseur neurohormonal en peptides bioactifs, ainsi que la sécrétion de ces peptides, et ceci en fonction de l'état de différenciation cellulaire. En utilisant des techniques d'ADN recombinant, nous avons introduit le gène codant pour la pro-opiomélanocortine (POMC), protéine précurseur modèle, dans les cellules P19 non différenciées afin de vérifier si elles peuvent produire à la fois la β-lipotropine (β-LPH) et/ou en β-endorphine (β-END). Nous avons analysé la production de ces peptides par les cellules recombinantes à l'aide de techniques de HPLC sur tamis moléculaire et sur colonne C18, ainsi que d'un dosage radioimmunologique utilisant un anticorps qui reconnaît les formes POMC, β-LPH et β-END. Nos résultats montrent que les cellules produiraient soit de la β-END, suggérant qu'elles sont capables de cliver correctement la POMC. D'autre part, au moins 30% des peptides immunoréactifs sont nucléaires. Ceci indiquerait que les cellules non différenciées auraient la capacité d'exprimer les peptides avant de les relâcher dans le milieu extracellulaire, suggérant ainsi l'existence possible d'une voie de sécrétion régulée caractéristique de cellules neuroendocrines.
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