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Résumé du colloque
L'augmentation rapide de la bioluminescence qui débute vers le milieu de la période de croissance exponentielle chez Photobacterium fischeri, souche MAV, est un exemple remarquable d'une induction d'enzyme (luciférase). Pour étudier le mécanisme de cette induction, une souche MAV déficiente en luciférase a été utilisée dans des expériences de double marquage radioactif: la leucine-3H est incorporée au début de la phase de croissance exponentielle (action de la luminescence) alors que la leucine-14C est incorporée vers le milieu de la phase de croissance exponentielle (induction de la luminescence). Les cellules sont recueillies par centrifugation et lysées en associant le gel dégel et choc osmotique. Le surnageant protéinique de la fraction lysée est fractionné par chromatographie sur DEAE, par précipitation au sulfate d'ammonium et par électrophorèse sur gel de polyacrylamide en milieu dissociant (SDS). La luciférase purifiée est ensuite séparée en deux sous-unités non identiques (α et β). Une comparaison du rapport 3H/14 C dans les sous-unités de la luciférase avec celui des sous-unités des autres protéines indique que la synthèse des chaînes α et β est sujette à un contrôle semblable: l'induction est au niveau de la synthèse et non de la transcription du gène. Les expériences sont actuellement en cours pour déterminer s'il y a induction d'autres protéines durant cette même période et, s'il en est ainsi, de déterminer leur rôle dans la bioluminescence.
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