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Mécanismes physiques et biochimiques du ciblage des protéines Ras à la membrane plasmique dans les cellules de mammifères

Hans Schroeder
Sybille Rex
John R. Silvius
Rania Leventis
HS

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Hans Schroeder

Résumé du colloque

Des études antérieures ont démontré que le ciblage des protéines ras à la membrane plasmique est dirigé par le C-terminus farnésylé de la protéine, dont la séquence varie selon l'isoforme. Nous avons examiné les mécanismes du ciblage intracellulaire de la N-ras ainsi que de la K-ras4B en utilisant des peptides farnésylés basés sur l'extrême C-terminus des deux protéines. La séquence C-terminale de la N-ras comprend un site de palmitylation qui se situe à quelques résidus d'acides aminés du C-terminus farnésylé et qui est essentiel au ciblage de la protéine à la membrane plasmique. Des expériences biochimiques et de microscopie de fluorescence ont démontré que des peptides farnésylés basés sur cette séquence sont palmitylés spécifiquement à la membrane plasmique dans les fibroblastes de mammifères, et que cette modification joue un rôle essentiel pour l'accumulation spécifique de ces peptides à la membrane plasmique. Nous proposons que la palmitylation de la N-ras spécifiquement au niveau de la membrane plasmique sert à retenir la protéine à la membrane tant que le groupe palmityl reste lié à la protéine, permettant un ciblage efficace, mais dynamique. L'extrême C-terminus de la K-ras4B comprend une séquence polybasique avoisinant le site de farnésylation. Nous avons trouvé que des peptides basés sur cette séquence montrent une très forte capacité à discriminer entre différentes surfaces lipidiques en fonction de la charge de surface. En utilisant des protéines de fusion GFP-K-ras4B, nous cherchons au moment actuel à déterminer si le ciblage intracellulaire de la séquence C-terminale de la K-ras4B repose sur des interactions électrostatiques protéine-lipide ou plutôt sur des interactions protéine-protéine.

Contexte

Section :
Structure et fonctions des membranes biologiques : de la physique à la biologie
news icon Thème du colloque :
Structure et fonctions des membranes biologiques : de la physique à la biologie
host icon Hôte : Université Laval

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Titre du colloque :

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