Colloque

Mesure de l'activité de la RNA polymérase chloroplastique in vivo chez Chlamydomonas reinhardtii

G. Bellemare

M. Guertin

Membre a labase

G. Bellemare

Résumé du colloque

Des cellules de Chlamydomonas reinhardtii traitées au toluène à 0°C et 25°C incorporent des ribonucléosides triphosphates (NTP) dans leur RNA chloroplastique à 25°C et 35°C in vitro. L'incorporation requiert les quatre NTP, du Mg++, elle est complètement inhibée par la DNase, la RNase, l'AMP et est inhibée de 90% par la rifampicine (350 µg/ml). Cependant l'incorporation est presque complètement insensible à l'amanitine et au chloramphénicol à 200 µg/ml. Ces résultats montrent que celles traitées au toluène synthétisent principalement le RNA chloroplastique. Ce système est exclusif en vitro, car seulement l'analyse de la RNA polymérase chloroplastique in vivo est possible. En utilisant des cellules traitées au toluène, nous avons mesuré l'amincissement de la synthèse enzymique impliquant les mitochondries. Par des expériences passées et récentes, nous avons confirmé que la transcription chloroplastique est stimulée par l'addition de cycloheximide, ce qui permet l'analyse de l'activité de la RNA polymérase chloroplastique in vivo. Cette enzyme est présente dans les cellules toluénisées et incapable d'agir à cause de la destruction du noyau.

Contexte

Section :

Biochimie

Thème du colloque :

Biochimie

Hôte : Université de Montréal

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Titre du colloque :

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