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Résumé du colloque
Le 4-chlorobenzoate est métabolisé par Pseudomonas sp. CBS3 via la voie du 3-cétoadipate. Ce processus implique une déshalogénation directe du noyau aromatique avant l'ouverture du cycle, une réaction enzymatique très rare. Les gènes codant cette activité ont été introduits dans un vecteur d'expression (PMM22) et transférés à Pseudomonas putida R2440 (métabolise le 4-hydroxybenzoate) d'utiliser le 4-chlorobenzoate comme seule source de carbone. Des études sur l'étendue de spécificité du système enzymatique sur substrat analogue (4-chlorophénylacétate; source de carbone utilisable par P. sp. CBS3) semblent démontrer que plus d'un gène a été cloné. Les techniques du Maxicell (avec E. coli CS 603), de l'électrophorèse en gel de polyacrylamide, de la chloroidométrie et de la spectrophotométrie de masse ont permis de suivre la production enzymatique plasmidique et les métabolites résultant après chaque étape de sous-clonage.
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