Colloque

Méthode simple pour l'isolement rapide de plasmides recombinants

M. Dion

J. Yelle

D. Houde

C. Hamelin

Membre a labase

M. Dion

Résumé du colloque

L'insertion d'un fragment d'ADN étranger dans le site Hind III du plasmide pAT153 inactive partiellement le gène tet, responsable de la résistance de Escherichia coli à la tétracycline. En présence de 80 μg/ml d'ampicilline et 4 μg/ml de tétracycline, les bactéries HB101 porteuses d'un plasmide recombinant forment sur agars complets, des colonies de taille inférieure à celles contenant le plasmide sauvage. Cette différence phénotypique importante nous a permis d'obtenir en quelques jours plusieurs centaines de plasmides dans lesquels des fragments Hind III de l'ADN du cytomégalovirus humain avaient été insérés. Dans les conditions actuelles, plus de 70% des petites colonies isolées sur milieu solide contiennent un plasmide recombinant; et les autres, le plasmide initial refermé sur lui-même. Aucun plasmide modifié n'a pu être détecté jusqu'à présent dans les colonies de taille plus grande. Cette méthode nous apparaît donc comme un moyen sûr et efficace pour sélectionner des clones transformés contenant de l'ADN recombinant.

Contexte

Section :

Biologie cellulaire

Thème du colloque :

Biologie cellulaire

Hôte : Université du Québec à Montréal

Découvrez d'autres communications scientifiques

Dans le même colloque
Du même congressiste

Titre du colloque :

Biologie cellulaire

Les gènes mobiles et la transposition de DNA

M.S. Dubow

Formation des colonies en milieu semi-liquide des neuroblastomes

T.K. Leung

Contenu peptidique du complexe de l'antenne chez Rhodospirillum rubrum

R. Picorel

Voir tous les contenus de ce colloque

Autres communications du même congressiste :

Thème du colloque :

Biologie cellulaire

Fréquence de fusion critique visuelle et lactates sanguins

M. Dion

Augmentation de l'activité ADN topoisomérase associée à la chromatine de cellules humaines en vieil…

C. Hamelin

L'axe hypophyso-leydigien à l'effort

G.R. Brisson