Colloque

Micro méthode de dosage des acides aminés d'hydrolysat de protéines par chromatographie liquide à haute performance (HPLC)

G. Parent

L. Savoie

Membre a labase

G. Parent

Résumé du colloque

Certains traitements industriels ou domestiques peuvent modifier la composition en acides aminés des sources protéiques. Par exemple, le traitement alcalin de différentes protéines permet la production de certains acides aminés non naturels, tels que la lysinoalanine. Nous avons mis au point une méthode de dosage ultra sensible (picomoles) par chromatographie liquide à haute performance (HPLC). L'hydrolysat protéique (HCl 6 N, 24 h) est repris dans un tampon carbonate et réagit en présence d'un excès de chlorure de dansyl (1-diméthylaminonaphtalène-5-sulfonyl) afin de former un dérivé amine détectable à l'ultraviolet. Les dérivés dansylés sont chromatographiés sur une colonne à phase inverse C18 (MCH-10, Varian) avec un gradient linéaire d'élution acétonitrile: eau. La sensibilité limite de détection est d'environ 250 pmoles par absorption dans l'ultraviolet (350 nm) des dérivés. Les dérivés dansylés sont identifiés par comparaison des temps de rétention, la sensibilité et le pouvoir de résolution de cette méthode sont supérieurs aux autres méthodes de dosage des acides aminés (chromatographie en couche mince, par échangeur d'ions).

Contexte

Section :

Nutrition et vivres

Thème du colloque :

Nutrition et vivres

Hôte : Université Laval

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