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Résumé de la communication
Ce biotest marin permettra d’évaluer le potentiel immunotoxique d’échantillons aqueux provenant de rejets urbains, industriels ou agricoles en milieu côtier. Les étoiles (L. polaris) sont gardées en circulation continue d’eau de mer pour de longues périodes et les amoebocytes, en très forte majorité phagocytaires, sont obtenues par une simple ponction du liquide coelomique d’une étoile de mer sans sacrifier l’animal donneur. Les cellules récupérées sont exposées en microplaque afin d’évaluer leur réponse potentielle face à un substrat contaminé. Le premier objectif de cette étude est la mise au point du biotest qui comporte trois variables : la viabilité cellulaire (cytotoxicité) et la phagocytose (fonctionnement cellulaire) mesurée par fluorescence et la rétention lysosomale (potentiel d’action membranaire) mesurée par absorbance. Le test de phagocytose en microplaque est comparé au test de phagocytose par cytométrie en flux. Le tributylétain (TBT), un biocide immunotoxique reconnu, ainsi que le cuivre et le zinc sont utilisés comme références positives pour la mise au point. La toxicité de composés bromés, en concentration de plus en plus importante dans notre environnement, est également déterminée à l’aide de cette méthode. Les trois tests sont effectués entièrement en microplaque 96 puits après le temps d’exposition préalablement choisi. Le test de viabilité cellulaire montre une DL50 semblable à ce qui est retrouvé dans la littérature pour le TBT. Le développement du biotest comporte une phase de développement pour l’adapter aux eaux interstitielles et de lixiviation provenant de sédiments marins. La toxicité de sédiments obtenue par cette méthode est comparée à celle obtenue avec Microtox®.
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