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Mise au point d'un micro-essai pour évaluer la cytotoxicité in vitro de toxines solubles ou particulaires

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Denis Nadeau

Résumé du colloque

Les métaux lourds sont reconnus depuis longtemps comme des pneumotoxiques environnementales majeures. Parmi les cellules cibles des poumons, on retrouve les macrophages alvéolaires (MA), une des défenses primaires du poumon profond. Obtenus par lavages broncho-alvéolaires (BAL), les MA sont d'abord ensemencés dans des micro-plaques à culture 105 (5μ/puits). Après adhérence, les MA sont ensuite exposés à 8 h à des ions métalliques tels que les chlorures de cadmium (Cd), de béryllium (Be) et de chrome (Cr). Les paramètres évalués de cytotoxicité sont: les libérations extracellulaires de la déshydrogénase lactique (DHL) et de β-galactosidase (β-GAL), la production de lactate (LAC) et l'ATP cellulaire. Nous observons par ordre décroissant; a) de toxicité: Cd > Be > Cr; b) de sensibilité des paramètres: ATP > LAC > LDH > β-GAL; c) d'intensité d'effet: ATP = LAC > LDH > β-GAL. Un optimum 15 fois moindre de MA qu'avec nos essais standards; le micro-essai permet donc d'évaluer la dose-réponse complète (ex. LAC = 10-3 M) d'une cytotoxicité même avec un seul rat, le rendement cellulaire en LAC étant de 107/animal.

Contexte

news icon Thème du colloque :
Pharmacologie et toxicologie
host icon Hôte : Université de Montréal

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Titre du colloque :

Pharmacologie et toxicologie

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