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Résumé du colloque
La sélection d'anticorps monoclonaux spécifiques à l'énképhalinase de la membrane de bordure en brosse (MBB) du tube proximal du rein de lapin s'avère un outil précieux pour purifier et caractériser cette enzyme. Une réaction croisée contre l'énképhalinase de rat et de porc a été démontrée par immunoprécipitation sur papier de nitrocellulose après SDS-PAGE. L'anticorps monoclonal nous a permis de démontrer la présence de l'énképhalinase dans les MBB rénale et intestinale chez le rat, de même qu'au niveau de la bordure d'intestin grêle de foetus humain âgé de 20 semaines. L'énképhalinase rénale et intestinale de ces différentes espèces a été purifiée sur colonne d'immunoaffinité à l'aide d'un des anticorps monoclonaux développés contre la membrane rénale. Ces enzymes présentent la même sensibilité face à des inhibiteurs spécifiques tels le thiorphan et le phosphoramidon et des poids moléculaires comparables. Nous avons, de plus, déterminé leurs caractéristiques cinétiques par hydrolyse de la (3H) Tyr-Leu-enképhaline et comparé leur portion protéolytique après digestion par une endoglycosidase.
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