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Mode d'action de la toxine insecticide Cry9Ca du Bt : effets du micro-environnement physico-chimique sur la formation des pores dans la membrane intestinale du sphinx du tabac

Jean-Frédéric Brunet
Raynald Laprade
Jean-Louis Schwartz
Vincent Vachon
Jeroen Van Rie
JB

Membre a labase

Jean-Frédéric Brunet

Résumé du colloque

La plupart des toxines insecticides du bacille de Thuringe (Bacillus thuringiensis, ou Bt) sont transformées en protéines actives par les protéases intestinales de l'insecte. Le domaine I de la forme active, formé d'hélices-alpha amphipathiques, est responsable de l'insertion de la toxine dans la membrane luminale des cellules intestinales, créant un pore peu sélectif qui abolit les gradients transmembranaires et provoque la mort cellulaire. Bien que la Cry9Ca et deux de ses mutants (R164K et R164A) soient actifs contre les larves de Manduca sexta, leur capacité à former des pores dans des vésicules isolées de la membrane intestinale de l'insecte semble très limitée à pH 10.5, caractéristique de l'intestin des Lépidoptères. Des expériences de gonflement osmotique sur ces membranes ont montré que la Cry9Ca et ses mutants, préalablement activés, forment des pores à pH 7.5, d'un diamètre élevé et de sélectivité faible. La formation de pores devient par contre pratiquement nulle à pH 10.5, même si la Cry9Ca et ses mutants dépolarisent la membrane luminale d'intestins fraîchement isolés de M. sexta baignant dans une solution à pH 10.5 et à force ionique élevée. En présence de jus intestinal, cette dépolarisation est fortement accentuée, un effet qui n'est pas aboli après dénaturation du contenu protéique à 100 degrés Celsius ou par réduction de la force ionique du jus par dialyse. En somme, ces résultats indiquent que la formation de pores par la Cry9Ca est fortement dépendante des conditions physico-chimiques sous lesquelles elle se produit. Ils suggèrent aussi un rôle important des agents émulsifiants du jus intestinal dans l'activité de la toxine.

Contexte

Section :
Protection des cultures dans un contexte de réduction de l'utilisation des pesticides chimiques
news icon Thème du colloque :
Protection des cultures dans un contexte de réduction de l'utilisation des pesticides chimiques
host icon Hôte : Université du Québec à Montréal

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Titre du colloque :

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