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Mutagénèse à l'aide du transposon Tn917: Étude moléculaire des mutants men- (ménaquinone-déficients) de Staphylococcus aureus

Annie Tremblay
Alexandre Sasarman
AT

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Annie Tremblay

Résumé du colloque

Les ménaquinones font partie de la chaîne respiratoire des bactéries Gram+ où elles remplacent l'ubiquinone. Les premiers mutants men- de S. aureus furent obtenus par sélection avec ménoquine (Sasarman et al. 1969. Nature 224:272), mais aucun essai de clonage des gènes respectifs n'a été entrepris jusqu'à présent. Le but de notre travail a été justement de cloner les gènes men- de S. aureus. Afin de faciliter le clonage des gènes men, nous avons utilisé la mutagénèse à l'aide du transposon Tn917 (Eryr), porté par un plasmide thermosensible (pTV1). Les mutants obtenus ont été identifiés à l'aide de la ménadione, car la majorité des mutants men- de S.aureus sont stimulés par la ménadione. Plusieurs mutants men- furent obtenus et nous avons cloné deux sites d'insertion du transposon. Ces sites ont été sous-clonés sur la base des cartes de restriction que sur la base des premiers fragments séquencés. Nous sommes en train de séquencer les gènes respectifs afin de comparer les séquences obtenues avec celles des gènes men- identifiés chez d'autres microorganismes.

Contexte

Section :
Biochimie, biologie moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biochimie, biologie moléculaire
host icon Hôte : Université du Québec à Montréal

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Titre du colloque :

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