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Mutagénèse dirigée de la 17B-hydroxystéroïde déshydrogénase

Isabelle Pineau
Serge Laberge
Sheng-Xiang Lin
Jean Cloutier
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Isabelle Pineau

Résumé du colloque

Les déshydrogénases à courtes chaînes, notamment la 17B-hydroxystéroïde déshydrogénase (17B-HSD), jouent un rôle important dans la biosynthèse des hormones stéroïdiennes en catalysant la formation et la dégradation d'importants stéroïdes sexuels actifs qui stimulent la prolifération des tumeurs mammaires. L'amélioration des connaissances de la relation structure/fonction de la 17B-HSD permettra de faciliter le design d'inhibiteurs efficaces et de créer un enzyme. Présentement, nous effectuons cette étude à l'aide de la mutagénèse dirigée utilisant la réaction en chaîne de la polymérase (PCR). La détermination des sites potentiels à muter est possible grâce aux informations structurales qui proviennent de la résolution des cristaux de la 17B-HSD obtenus dans notre groupe. Afin d'étudier les interactions entre les deux sous-unités de la 17B-HSD, nous avons muté l'ADN complémentaire dans la région charnière de ces deux sous-unités, induisant ainsi un changement mineur dans la structure. La surproduction de ce mutant dans le système d'expression de Baculovirus sera ensuite réalisée. Des études d'enzymologie et de cristallographie permettront de déterminer l'ampleur de la modification apportée à la structure sur la fonction de l'enzyme.

Contexte

Section :
Biochimie, biologie moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biochimie, biologie moléculaire
host icon Hôte : Université du Québec à Chicoutimi

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Titre du colloque :

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Thème du colloque :

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