Colloque

Mutants galactose- de cellules d'hamster chinois

R. Labrecque

J.P. Thirion

Membre a labase

R. Labrecque

Résumé du colloque

Jacob et Monod ont étudié la régulation des gènes bactériens en isolant des mutants lactose-. Nous avons procédé de même avec des cellules d'hamster chinois V6 en isolant des mutants Gal-. Les cellules V6 (Gal+ Glu+) peuvent croître en présence de galactose (Gal) ou en présence de glucose (Glu) ou en présence des deux. Après mutagénèse par l'éthyl méthanesulfonate et expression des mutations, quelque 5x10^5 cellules sont mises à croître dans le milieu de Dulbecco sans glucose, 2x10^-5M bromodeoxyuridine (BUdR) et 1 mg/cc de galactose pendant deux jours. Elles sont ensuite irradiées à 313 nm. Ceci tue les cellules de type sauvage ayant incorporé le BUdR mais non les mutants. Les quelques 20 à 40 cellules survivantes sont ensuite testées pour leur capacité à croître en galactose ou en glucose. Six mutants indépendants furent ainsi isolés qui ne peuvent croître qu'en milieu glucose mais non en milieu galactose (phénotype Gal- Glu+). Ce phénotype est stable au cours des nombreuses générations suivantes. La fréquence des mutants augmente avec le temps d'exposition au mutagène. Ces deux choses indiquent donc qu'il s'agit bien d'une mutation affectant le génotype et non d'une modification phénotypique non génétique. La caractérisation biochimique de ces mutants a commencé.

Contexte

Section :

Biochimie et biologie cellulaire et moléculaire

Thème du colloque :

Biochimie et biologie cellulaire et moléculaire

Hôte : Université Laval

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