Nouveaux vaccins : production de plantes transgéniques qui expriment les protéines du cœur des virus de l'hépatite B (HBV) et de l'hépatite de la marmotte d'Amérique (WHV)
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Résumé du colloque
Des particules sous-virales recombinantes du HBV ont été utilisées pour transporter des antigènes de virus étrangers sur leur surface. L’expression dans les plantes transgéniques pourrait être avantageux dans la production de vaccins pour administration par la route orale. Le but de cette recherche est d’exprimer les protéines du coeur du HBV et du WHV dans le riz et le tabac. Le clonage et l’expression prokaryotique et eukaryotique des gènes du coeur du HBV et du WHV ont été faits à l’aide de techniques standards en biologie moléculaire. La séquence de nucléotides correspondante aux premiers 150 acides aminés de ces gènes ont été préparés par PCR et insérés dans le plasmide pKK233-2 pour expression dans E. coli JM109. La capacité de ces deux protéines pour s’assembler en particules n’a pas été perturber par la troncation. Deux nouveaux sites de restriction, XbaI à l’acide aminé 78 et XhoI à l’acide aminé 140, ont été incorporés dans la séquence du WHV pour l’insertion d’épitopes actifs. Les séquences codantes du HBV et du WHV ont été transférées dans le plasmide Camter-III pour la transformation du tabac. Le plasmide pAHC25 a été modifié en remplacant le gène codant pour le GUS par les séquences du HBV ou du WHV. La cassette d’expression comprenant le promoteur de l’ubiquitin et la séquence du HBV ou du WHV a été enlevée pour insertion dans le plasmide pKHG4 pour la transformation du riz. La transformation à l’aide de l’Agrobacterium a été complétée pour le tabac et le riz. 30 plantes de tabac transgéniques ont été regénérées et la présence de l’ADN recombinant et du mRNA a été confirmée.
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