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Résumé du colloque
Nous postulons que la genèse de novo de transposons multirésistants chez les bactéries Gram négatif implique l'existence d'une région spécifique permettant l'acquisition de gènes de résistance. Par clonage directionnel dans le plasmide pACY184, nous avons isolé un fragment cryptique d'ADN BamHI-NruI de 1,45 kb adjacent au gène ß-lactamase OXA-2. La carte physique détaillée du plasmide recombinant pMON23 a été construite en utilisant 10 enzymes de restriction. Une homologie structurale entre les fragments d'ADN adjacents à 16 gènes ß-lactamases différentes a été confirmée par hybridation moléculaire en utilisant les fragments d'ADN BamHI-AvaI (600 bp) et AvaI-EcoRI (650 bp) de pMON23 comme sondes. Par hybridation de type Southern, ces fragments de restriction homologues à ces sondes ont été localisés dans les régions adjacentes de 12 transposons ß-lactamases différents. La fonction de transfert a été clonée et trouvée dans pMON23 a été testée par la génétique in vivo (recA-) d'un transposon OXA-2 en utilisant R388::Tn1 et en mesurant la défaillance de pMON23. Nous avons temporairement démontré cette nouvelle fonction génétique comme étant un gène d'intégrase (tnpI) qui pourrait être impliquée dans l'évolution moléculaire des transposons complexes.
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