Colloque

Oligomérisation d'un transporteur membranaire impliquant des ponts disulfures

Quynh-Tran Nguyen

Membre a labase

Quynh-Tran Nguyen

Résumé du colloque

La réabsorption rénale de phosphate est un mécanisme essentiel à l’homéostasie. Les cellules du tubule contourné proximal utilisent des transporteurs de phosphate sous dépendance sodique pour effectuer la réabsorption. Deux gènes de transporteurs de phosphate ont été clonés chez les mammifères. La caractérisation du type deux (NaPi-2) a été entreprise afin de mieux comprendre sa régulation. Des anticorps ont été générés contre les portions N et C terminales du transporteur pour des études d’immunodétection par Western Blot. Les résultats d’immunodétection ont démontré que l’expression du transporteur (NaPi-2) est accrue lors d’une diète hypophosphatémique et que diverses sous-unités apparaissent en présence d’agents réducteurs. Des études de transport ont permis de confirmer l’altération de la fonction du transporteur de phosphate par les agents réducteurs. Les expériences d’inactivation par irradiation ont déterminé la masse fonctionnelle de NaPi-2 qui correspondrait à un complexe oligomérique. Une méthode de purification a été développée laquelle s’appuie sur le changement du profil de détection en présence d’agents réducteurs. Une étape de séparations électrophorétiques sur colonne de gel SDS-PAGE à élution continue a permis d’obtenir une fraction enrichie de la sous-unité C-terminale de NaPi-2. Suivant cette étape, une déglycosylation a éliminé la majorité des contaminants restants. La composition en acides aminés d’un fragment de la sous-unité C-terminale de NaPi-2 purifié a permis de quantifier celle-ci, ce qui a amené, par la technique d’immunodétection, la quantification réelle de NaPi-2 dans les membranes en bordure en brosse. Cette caractérisation du transporteur NaPi-2 permet une meilleur compréhension des mécanismes qu’utilise le rein pour maintenir l’homéostasie.

Contexte

Section :

Biologie cellulaire et moléculaire

Thème du colloque :

Biologie cellulaire et moléculaire

Hôte : Université de Trois-Rivières

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Titre du colloque :

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