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Résumé du colloque
L'hydantoinase de Pseudomonas fluorescens DSM 84 transforme le dihydrooracil, un N-carbamyl-beta-alanine, le précurseur de la D-alanine. Des études antérieures ont montré que l'activité de l'hydantoinase était instable et que le N-carbamyl-beta-alanine s'avérait difficile à isoler, lorsque des extraits cellulaires étaient à l'étude. Afin d'optimiser et de stabiliser l'activité de cette hydantoinase, des cellules entières de Pseudomonas fluorescens sont soumises à divers facteurs. L'activité enzymatique est évaluée en quantifiant le N-carbamyl-beta-alanine, par spectrophotométrie. Les meilleurs résultats ont été obtenus au cours d'une incubation à 35°C, de cellules entières de Pseudomonas fluorescens dans du tampon Tris-HCl pH 9.0 avec du MgSO₄ à 10 micromolaires.
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